聚苯乙烯熒光微球在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有著越來越廣泛的應(yīng)用，其中的一項重要

應(yīng)用是基于熒光微球的流式細(xì)胞分析技術(shù)，該技術(shù)可廣泛用于細(xì)胞分選、定量、

免疫分析及快速診斷。該技術(shù)采用兩種粒子:熒光標(biāo)準(zhǔn)校正微球用于儀器的校正

及定量研究，熒光編碼微球用于高通量免疫分析，而這兩種粒子都要求熒光強(qiáng)度

高、精確定量染色、單分散性好。

    目前己有的聚苯乙烯熒光微球制備方法中，吸附法、鍵合法、包覆法等表面

修飾方法制得的微球穩(wěn)定性差，染料分子容易脫落、泄露。包埋法、共聚法等存

在染料干擾聚合反應(yīng)過程的現(xiàn)象。而溶脹法以其操作簡單，制得的熒光微球性質(zhì)

穩(wěn)定、可以精確定量染色，從而引起廣泛關(guān)注。然而傳統(tǒng)的溶脹法通常將聚苯乙

烯種子微球分散于異丙醇等有機(jī)溶劑中采用甲苯、氯仿等作為溶脹劑將熒光染料

引入微球中，這種方法制得的微球熒光非常微弱，容易造成種子微球溶解粘連，

并且制備過程對環(huán)境污染大。

    本文對聚苯乙烯熒光微球制備的傳統(tǒng)溶脹法進(jìn)行了改進(jìn)，并將改進(jìn)后的溶脹

法與傳統(tǒng)溶脹法、共聚法、包埋法進(jìn)行了比較，結(jié)果顯示改進(jìn)溶脹法操作簡便、

干擾因素少、可以定量染色、環(huán)境友好，制備出的微球性質(zhì)穩(wěn)定、熒光強(qiáng)度高、

單分散性好。全文共分以下幾部分內(nèi)容:

    首先，對熒光微球制備的傳統(tǒng)溶脹法進(jìn)行改進(jìn)，以二氯甲烷作溶脹劑，0.25

SDS水溶液作分散體系分別將NBD-A、羅丹明B正辛酷、Nile blue A溶脹進(jìn)聚

苯乙烯微球，制備出了熒光強(qiáng)度高、單分散性好、光學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、定量染色的綠

色、橙色、紅色三種熒光微球。將發(fā)生熒光共振能量轉(zhuǎn)移的兩種染料羅丹明B

正辛酷與Nile blue A同時溶脹進(jìn)種子微球中而制備了能產(chǎn)生雙熒光信號的熒光

編碼微球。對溶脹法制備的熒光微球的穩(wěn)定性進(jìn)行了考察，結(jié)果顯示其pH穩(wěn)定

性、光穩(wěn)定性良好。

    第二，對其它熒光微球制備方法:共聚法、包埋法、二步溶脹法進(jìn)行了考察，

并將改進(jìn)后的溶脹法與共聚法、包埋法進(jìn)行了比較，結(jié)果顯示，這幾種方法制備

的熒光微球性質(zhì)都比較穩(wěn)定，其中溶脹法干擾因素最少、操作最為簡便。幾種方

法結(jié)合使用，成功制備出了粒徑0.1 }m一15 }m、性質(zhì)穩(wěn)定、單分散性良好的

綠色、橙色、紅色三種熒光微球，可滿足不同領(lǐng)域的應(yīng)用需要。

    第三，采用流式細(xì)胞儀對溶脹法制備的熒光微球進(jìn)行表征。

    綜上所述，本文對聚苯乙烯熒光微球制備的傳統(tǒng)溶脹法進(jìn)行了改進(jìn)，將其與

傳統(tǒng)溶脹法、共聚法、包埋法等方法進(jìn)行了比較，并為其在流式細(xì)胞儀中的應(yīng)用

打下一定基礎(chǔ)。